産品中心

Proteinase K (recombinant), PCR grade

貨号/規格：E1019-A/1 mL; E1019-B/1 mL × 5

濃度：≥ 600 U/mL (~20 mg/mL)

産品簡介

蛋白酶K是(shì)一(yī / yì ／yí)種能夠打開脂肪族、芳香族或疏水氨基酸羧基端肽鍵的(de)内分解酶。蛋白酶K屬于(yú)絲氨酸蛋白酶家族。本品最小可水解四肽。

産品組成

儲存條件

保存于(yú)-20°C。

來(lái)源

重組畢赤酵母菌株，含有來(lái)自Tritirachium album的(de)克隆基因。

單位定義

一(yī / yì ／yí)個(gè)單位是(shì)指使用變性血紅蛋白作爲(wéi / wèi)底物，在(zài)37°C下1分鍾内釋放出(chū)對應于(yú)1μmol酪氨酸的(de)Folin陽性氨基酸和(hé / huò)肽所需的(de)酶量。在(zài)以(yǐ)下混合物中測定酶活性：0.08M磷酸鉀（pH 7.5），5M尿素，4mM NaCl，3mM CaCl ₂和(hé / huò)16.7mg / mL血紅蛋白。

特點

• 即用型溶液

• 兼容廣泛的(de)反應條件

适用範圍

• 從鼠尾中分離基因組DNA

• 從培養細胞中分離基因組DNA

• 在(zài)從組織或細胞系分離DNA和(hé / huò)RNA的(de)過程中清除DNase和(hé / huò)RNase

• 确定酶的(de)位置

• 改善PCR産物的(de)克隆效率

抑制與失活

• 苯基甲基磺酰氟和(hé / huò)氟化二異丙基磷酸酯完全抑制該酶。

• 蛋白酶 K 不(bù)會被金屬螯合劑、硫醇反應性試劑或特定的(de)胰蛋白酶和(hé / huò)糜蛋白酶抑制劑滅活。

注意事項

• 蛋白酶K的(de)推薦工作濃度爲(wéi / wèi)0.05至1mg/mL。0.2至1%的(de)SDS或1至4M的(de)尿素能夠提升酶活

• Ca²⁺能夠保護蛋白酶K抵抗自分解作用，增加熱穩定性并能夠調節蛋白酶K底物結合位點的(de)功能

• 在(zài)很寬的(de)pH值範圍内保持穩定：pH4.0至12.5，最佳活性範圍爲(wéi / wèi)pH 7.5至8.0

• 在(zài)50至55°C具有最優的(de)活性

• 在(zài)65°C以(yǐ)上(shàng)溫度迅速發生變性

本品僅供科學研究使用。