DNase I, RNase-Free, HC
貨号/規格：E1018-A/1,000 U
濃度：50 U/µL
産品簡介
DNase I（無 RNase）是(shì)一(yī / yì ／yí)種可酶切單鏈和(hé / huò)雙鏈 DNA 的(de)核酸内切酶。它水解磷酸二酯鍵，産生帶有 5'-磷酸基團和(hé / huò) 3'-OH 基團的(de)單脫氧核糖核苷酸和(hé / huò)寡脫氧核糖核苷酸。
該酶的(de)活性嚴格依賴于(yú) Ca2+，由 Mg2+ 或 Mn2+ 離子(zǐ)活化。
在(zài) Mg2+ 存在(zài)時(shí)，DNase I 以(yǐ)統計意義上(shàng)随機的(de)方式獨立切割 dsDNA 各鏈。Mn2+ 存在(zài)時(shí)，該酶幾乎在(zài)同一(yī / yì ／yí)位點切割兩條 DNA 鏈，産生帶有平末端或僅一(yī / yì ／yí)或兩個(gè)核甘酸的(de)突出(chū)端的(de) DNA 片段。
産品組成
| 組分 | E1018-A |
| DNase I, RNase-Free, HC (50 U/µL) | 20 µL |
| 10X DNase I Buffer (Mg2+ Plus) | 1 mL |
| EDTA (50 mM) | 1 mL |
儲存條件
保存于(yú)-20°C。
來(lái)源
重組 E. coli 菌株，含有編碼牛 DNase I 的(de)克隆基因。
單位定義
一(yī / yì ／yí)個(gè)單位是(shì)指在(zài)37°C下1分鍾内完全降解 1 µg質粒 DNA所需的(de)酶量。
在(zài)以(yǐ)下混合物中測定酶活性：
10 mM Tris-HCl（25°C 時(shí) pH 7.5）、2.5 mM MgCl 2、0.1 mM CaCl 2、1 µg pUC19 DNA。一(yī / yì ／yí)個(gè) DNase I 單位相當于(yú) 0.3 Kunitz 單位。
特點
• 重組酶
• 從非動物宿主純化而(ér)來(lái)，内源性 RNase 水平較低
适用範圍
• 制備不(bù)含 DNA 的(de) RNA
• 體外轉錄後去除模闆 DNA
• 在(zài)進行 RT-PCR 和(hé / huò) RT-qPCR 之(zhī)前制備無 DNA 的(de) RNA
• 與 DNA 聚合酶 I 配合，通過缺口平移進行 DNA 标記
• 采用 DNase I（無 RNase）足迹法進行 DNA-蛋白相互作用研究
• 生成随機重疊 DNA 插入片段文庫。使用含有 Mn2+ 的(de)反應緩沖液