RNase A
BR級，僅供研究使用
貨号：N9047
規格：1g
比活性：≥3000U/mg蛋白（≥60Kunitz單位/mg蛋白）。
形式：含有1 g RNase A，凍幹粉末
産品說(shuō)明
RNase A是(shì)一(yī / yì ／yí)種内切核糖核酸酶，分子(zǐ)量爲(wéi / wèi)13.7 kDa（單體），可在(zài)C和(hé / huò)U殘基位置特異性降解單鏈RNA。該酶可以(yǐ)切割核苷酸5’-核糖與鄰近嘧啶核苷3’-核糖上(shàng)磷酸基團之(zhī)間的(de)磷酸二酯鍵，産生的(de)2’, 3’-環磷酸可以(yǐ)水解成相應的(de)3’-核苷磷酸鹽。
RNase A推薦工作濃度1-100 μg/ml，因應用類型的(de)不(bù)同而(ér)異。該酶在(zài)多種反應條件下均有活性。低鹽離子(zǐ)濃度時(shí)（0-100 mM NaCl），RNase A可以(yǐ)切割單鏈RNA、雙鏈RNA、以(yǐ)及RNA/DNA雜合子(zǐ)中的(de)RNA；然而(ér)，當NaCl濃度大(dà)于(yú)300 mM時(shí)，RNase A則特異性切割單鏈RNA。
應用
——質粒和(hé / huò)基因組DNA的(de)制備
——從重組蛋白制劑中去除RNA
——核糖核酸酶保護試驗
——定位DNA或RNA中的(de)單堿基突變
保存條件
4℃保存。在(zài)密封和(hé / huò)幹燥條件下儲存的(de)保質期爲(wéi / wèi)三年。RNase A粉末可在(zài)室溫下運輸。
質量控制
功能檢測方法爲(wéi / wèi)質粒DNA提取過程中的(de)RNA降解。
活性單位的(de)定義
當酵母RNA在(zài)37°C和(hé / huò)pH 5.0下被水解時(shí)，一(yī / yì ／yí)個(gè)單位的(de)酶在(zài)260 nm處導緻吸光度增加1.0。
50U大(dà)約相當于(yú)1個(gè)Kunitz單位。
抑制和(hé / huò)失活
-抑制劑：最有效的(de)抑制劑是(shì)來(lái)自哺乳動物細胞細胞質中的(de)~50 kDa蛋白，如核boLock™RNase抑制劑。
-其他(tā)抑制劑：尿苷2’,3’-環釩酸鹽、5’-二磷酸腺苷3’-磷酸鹽和(hé / huò)5’-二磷酸腺苷2’-磷酸鹽(2)、SDS、焦碳酸二乙酯、4M胸氰酸胍加0.1M 2-巯基乙醇和(hé / huò)重金屬離子(zǐ)。
-用苯酚/氯仿萃取法滅活。
-在(zài)95°C下加熱10分鍾後滅活。
本品僅供科學研究使用。