什麽是(shì)PCR實驗的(de)靈敏度?
靈敏度指的(de)是(shì)PCR擴增反應能夠檢測到(dào)目的(de)基因的(de)最小值。研究結果表明，影響PCR擴增效率的(de)因素，如模闆的(de)複雜程度與完整性、引物的(de)純度及其與模闆的(de)結合效率、反應溫度、DNA聚合酶的(de)熱穩定性與擴增性能、反應緩沖液的(de)離子(zǐ)組成（主要(yào / yāo)指陽離子(zǐ)）、反應優化劑等等，都決定了(le／liǎo)PCR實驗的(de)檢測靈敏度。在(zài)最佳的(de)擴增條件下，常規PCR反應能夠檢測到(dào)的(de)pg(10-12g)數量級的(de)目的(de)基因。對于(yú)一(yī / yì ／yí)個(gè)特定的(de)目的(de)基因而(ér)言，模闆與引物通常都是(shì)已經限定好的(de)因素。因此，選擇什麽樣的(de)PCR反應體系（包括DNA聚合酶與反應緩沖液等）就(jiù)是(shì)研究者提高PCR實驗靈敏度的(de)關鍵因素了(le／liǎo)。
與實驗室自配的(de)PCR擴增體系相比，東盛的(de)Taq Mix對反應緩沖液中的(de)成分進行優化，并加入了(le／liǎo)适當比例的(de)反應增強劑（PCR Enhancer），提高了(le／liǎo)DNA聚合酶的(de)熱穩定性，顯著降低模闆的(de)二級結構對PCR擴增性能的(de)影響，使得DNA聚合酶處于(yú)最适活性狀态，從而(ér)獲得了(le／liǎo)比自配體系更高的(de)檢測靈敏度。即時(shí)反應體系中隻有幾個(gè)目的(de)基因的(de)拷貝，也(yě)能輕松檢測。
什麽是(shì)PCR實驗的(de)特異性？
特異性指的(de)是(shì)在(zài)PCR擴增過程中，專一(yī / yì ／yí)性地(dì / de)擴增目的(de)片段而(ér)非其他(tā)片段的(de)性能。在(zài)PCR實驗本身的(de)靈敏度很高，且實驗條件未充分優化的(de)情況，通常會在(zài)目的(de)片段出(chū)現的(de)同時(shí)伴随有其他(tā)的(de)雜帶，即發生非特異性擴增的(de)現象。模闆、引物性質及質量、反應條件的(de)控制等均會影響PCR擴增的(de)特異性。近年來(lái)的(de)研究結果表明，緩沖液的(de)品質（如離子(zǐ)種類與組成，反應優化劑等）對保證PCR的(de)特異性擴增起着不(bù)可忽視的(de)作用。一(yī / yì ／yí)般的(de)緩沖液中調節氫鍵作用的(de)鹽隻有KCl，而(ér)東盛HSTM TaqMix的(de)緩沖體系通過反應優化劑以(yǐ)及KCl/(NH4)SO4鹽離子(zǐ)體系的(de)平衡調節，顯著提高了(le／liǎo)PCR擴增的(de)特異性，降低背景。
PCR實驗的(de)靈敏度與特異性是(shì)一(yī / yì ／yí)對此長彼消的(de)特性，這(zhè)也(yě)決定我們實驗體系調節實際就(jiù)是(shì)找到(dào)适合實驗的(de)靈敏度與特異性的(de)平衡點。由于(yú)PCR體系中的(de)衆多成分，使得組合較多，篩選工作繁雜。東盛基于(yú)靈敏度與特異性分别設計了(le／liǎo)PCR Mix和(hé / huò)HS Taq Mix，幫您确定大(dà)的(de)平衡點，如果您需要(yào / yāo)更細緻的(de)平衡點，請選擇相應的(de)Mix Kit系列進行微調。